एक्रिडिन ऑरेंज (Acridine Orange): एक्रिडिन ऑरेंज एक फ्लोरोसेंट डाई है। यौगिक आनुवंशिक सामग्री से बांधता है और डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड (डीएनए) और राइबोन्यूक्लिक एसिड (आरएनए) के बीच अंतर कर सकता है। एक्रिडिन ऑरेंज एक कार्बनिक यौगिक है।
यह सेल चक्र निर्धारण के लिए उपयोगी एक न्यूक्लिक एसिड-चयनात्मक प्रतिदीप्त Cationic डाई के रूप में उपयोग किया जाता है। सेल-पारगम्य होने के नाते, यह क्रमशः इंटरकलेशन या इलेक्ट्रोस्टैटिक आकर्षण द्वारा डीएनए और आरएनए के साथ बातचीत करता है।
एक फ्लोरोसेंट डाई जैसे कि एक्रिडिन ऑरेंज आने वाली रोशनी की ऊर्जा को अवशोषित करता है। प्रकाश की ऊर्जा डाई अणुओं में गुजरती है। इस ऊर्जा को डाई द्वारा हमेशा के लिए समायोजित नहीं किया जा सकता है, और इसलिए इसे छोड़ दिया जाता है। जारी ऊर्जा आने वाली रोशनी की तुलना में एक अलग तरंग दैर्ध्य पर है, और इसलिए इसे एक अलग रंग के रूप में जाना जाता है।
एक्रिडिन ऑरेंज अपनी संरचना के कारण आने वाले विकिरण को अवशोषित करता है। अतिरिक्त ऊर्जा प्रभावी रूप से रिंग के चारों ओर से गुजरती है, जो रिंग के भीतर मौजूद विभिन्न बांडों के बीच वितरित की जाती है। हालांकि, डाई संरचना की स्थिरता को बनाए रखने के लिए ऊर्जा का प्रसार किया जाना चाहिए।
रिंग संरचना भी यौगिक में एक हाइड्रोफोबिक (वॉटर-हैटिंग) प्रकृति प्रदान करती है। जब समाधान में एक नमूने के लिए लागू किया जाता है, तो तीक्ष्ण नारंगी सूक्ष्मजीवों के आसपास की झिल्ली में अनायास फैलाने की प्रवृत्ति होगी। एक बार सेल के आंतरिक भाग में, एक्रीडीन ऑरेंज डीएनए के साथ और आरएनए के साथ एक जटिल बना सकता है। इन परिसरों के रसायन विज्ञान उत्सर्जित विकिरण की तरंग दैर्ध्य को प्रभावित करते हैं।
एक्रिडिन ऑरेंज-डीएनए कॉम्प्लेक्स के मामले में उत्सर्जित विकिरण हरा है। आरएनए के साथ गठित परिसर के मामले में, उत्सर्जित प्रकाश नारंगी है। विभिन्न रंग डीएनए को आरएनए से अलग करने की अनुमति देते हैं। जीवित और मृत जीवाणुओं और अन्य सूक्ष्मजीवों में अक्रिडीन नारंगी को न्यूक्लिक एसिड से बांधना होता है। इस प्रकार, डाई मृत रोगाणुओं से जीवित रहने का भेद करने का साधन नहीं है। न ही एक्रिडिन ऑरेंज एक प्रजाति के माइक्रोब बनाम एक अलग प्रजाति के बीच भेदभाव करता है।
हालांकि, एक नमूने में कुल जीवाणुओं की संख्या की गणना के साधन के रूप में एक्रिडिन ऑरेंज बहुत उपयोगी साबित हुआ है। जीवाणुओं की कुल संख्या बनाम जीवित जीवाणुओं की संख्या का ज्ञान बहुत उपयोगी हो सकता है, उदाहरण के लिए, जीवाणुओं के अस्तित्व पर जीवाणुरोधी एजेंट के प्रभाव का मूल्यांकन करना। एक्रिडिन ऑरेंज का उपयोग विशेष प्रकार की प्रकाश सूक्ष्म तकनीक में किया जाता है जिसे प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी कहा जाता है।
इसके अलावा, डीएनए या आरएनए की प्रतिदीप्ति फ्लो साइटोमेट्री की तकनीक का उपयोग करके एक नमूने में कोशिकाओं को विभेदित करने की अनुमति दे सकती है। इस तरह की जानकारी खमीर जैसे सूक्ष्मजीवों में डीएनए प्रतिकृति चक्र के विस्तृत विश्लेषण की अनुमति देती है।
यह सेल चक्र निर्धारण के लिए उपयोगी एक न्यूक्लिक एसिड-चयनात्मक प्रतिदीप्त Cationic डाई के रूप में उपयोग किया जाता है। सेल-पारगम्य होने के नाते, यह क्रमशः इंटरकलेशन या इलेक्ट्रोस्टैटिक आकर्षण द्वारा डीएनए और आरएनए के साथ बातचीत करता है।
एक फ्लोरोसेंट डाई जैसे कि एक्रिडिन ऑरेंज आने वाली रोशनी की ऊर्जा को अवशोषित करता है। प्रकाश की ऊर्जा डाई अणुओं में गुजरती है। इस ऊर्जा को डाई द्वारा हमेशा के लिए समायोजित नहीं किया जा सकता है, और इसलिए इसे छोड़ दिया जाता है। जारी ऊर्जा आने वाली रोशनी की तुलना में एक अलग तरंग दैर्ध्य पर है, और इसलिए इसे एक अलग रंग के रूप में जाना जाता है।
एक्रिडिन ऑरेंज अपनी संरचना के कारण आने वाले विकिरण को अवशोषित करता है। अतिरिक्त ऊर्जा प्रभावी रूप से रिंग के चारों ओर से गुजरती है, जो रिंग के भीतर मौजूद विभिन्न बांडों के बीच वितरित की जाती है। हालांकि, डाई संरचना की स्थिरता को बनाए रखने के लिए ऊर्जा का प्रसार किया जाना चाहिए।
रिंग संरचना भी यौगिक में एक हाइड्रोफोबिक (वॉटर-हैटिंग) प्रकृति प्रदान करती है। जब समाधान में एक नमूने के लिए लागू किया जाता है, तो तीक्ष्ण नारंगी सूक्ष्मजीवों के आसपास की झिल्ली में अनायास फैलाने की प्रवृत्ति होगी। एक बार सेल के आंतरिक भाग में, एक्रीडीन ऑरेंज डीएनए के साथ और आरएनए के साथ एक जटिल बना सकता है। इन परिसरों के रसायन विज्ञान उत्सर्जित विकिरण की तरंग दैर्ध्य को प्रभावित करते हैं।
एक्रिडिन ऑरेंज-डीएनए कॉम्प्लेक्स के मामले में उत्सर्जित विकिरण हरा है। आरएनए के साथ गठित परिसर के मामले में, उत्सर्जित प्रकाश नारंगी है। विभिन्न रंग डीएनए को आरएनए से अलग करने की अनुमति देते हैं। जीवित और मृत जीवाणुओं और अन्य सूक्ष्मजीवों में अक्रिडीन नारंगी को न्यूक्लिक एसिड से बांधना होता है। इस प्रकार, डाई मृत रोगाणुओं से जीवित रहने का भेद करने का साधन नहीं है। न ही एक्रिडिन ऑरेंज एक प्रजाति के माइक्रोब बनाम एक अलग प्रजाति के बीच भेदभाव करता है।
हालांकि, एक नमूने में कुल जीवाणुओं की संख्या की गणना के साधन के रूप में एक्रिडिन ऑरेंज बहुत उपयोगी साबित हुआ है। जीवाणुओं की कुल संख्या बनाम जीवित जीवाणुओं की संख्या का ज्ञान बहुत उपयोगी हो सकता है, उदाहरण के लिए, जीवाणुओं के अस्तित्व पर जीवाणुरोधी एजेंट के प्रभाव का मूल्यांकन करना। एक्रिडिन ऑरेंज का उपयोग विशेष प्रकार की प्रकाश सूक्ष्म तकनीक में किया जाता है जिसे प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी कहा जाता है।
इसके अलावा, डीएनए या आरएनए की प्रतिदीप्ति फ्लो साइटोमेट्री की तकनीक का उपयोग करके एक नमूने में कोशिकाओं को विभेदित करने की अनुमति दे सकती है। इस तरह की जानकारी खमीर जैसे सूक्ष्मजीवों में डीएनए प्रतिकृति चक्र के विस्तृत विश्लेषण की अनुमति देती है।
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| एक्रिडिन ऑरेंज (Acridine Orange) क्या है? |